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上海小鼠瘦素（LEP）ELISA試劑盒技術(shù)說(shuō)明書(shū)本生生物公司供應：ELISA試劑盒,血清，熒光定量PCR耗材，移液器吸嘴，微量離心管，進(jìn)口凍存管，細胞培養皿，培養板，培養瓶，吸頭，儀器及手套，色譜耗材，針頭過(guò)濾器。

英文名稱(chēng)：Mouse Leptin,LEP ELISA試劑盒

本試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(ELISA).已知待測物質(zhì)濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內進(jìn)行檢測。先將待測物質(zhì)和生物素標記的抗體同時(shí)溫育。洗滌后，加入親和素標記過(guò)的HRP。再經(jīng)過(guò)溫育和洗滌，去除未結合的酶結合物，然后加入底物A、B，和酶結合物同時(shí)作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中指標的濃度呈比例關(guān)系。

貨號：BS-2619

規格：96T/48T

產(chǎn)品名：小鼠瘦素（LEP）ELISA試劑盒

檢測種屬：人、大小鼠、豚鼠、兔子、豬、犬、牛羊、雞鴨、猴ELISA試劑盒等種屬。

保存條件及有效期：

1、試劑盒保存：2-8℃。

2、有效期：6個(gè)月

標記物：血清、血漿、組織勻漿等

【測試種屬】犬、大小鼠、人、豚鼠、兔子、牛羊、豬、雞鴨elisa試劑盒等種屬
【儲存方式】：2-8℃
【檢測目的】用于測定血清，血漿及相關(guān)液體等樣本。例如適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細胞培養上清、組織勻漿等標本。
【用途】科研實(shí)驗，不用于臨床診斷。

小鼠ELISA試劑盒 小鼠ELISAkit   試劑盒代測  瘦素（LEP）

上海小鼠瘦素（LEP）ELISA試劑盒技術(shù)說(shuō)明書(shū)

樣本處理及要求：

1. 血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清，保存過(guò)程中如出現沉淀，應再次離心。

2. 血漿：應根據標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清，保存過(guò)程中如有沉淀形成，應該再次離心。

3. 尿液：用無(wú)菌管收集，離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清，保存過(guò)程中如有沉淀形成，應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。

4. 細胞培養上清：檢測分泌性的成份時(shí)，用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時(shí)，用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復凍融，以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應再次離心。

5. 組織標本：切割標本后，稱(chēng)取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4)，用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。

6. 標本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻進(jìn)行，提取后應盡快進(jìn)行實(shí)驗。若不能馬上進(jìn)行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融.

7. 不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。

小鼠瘦素（LEP）ELISA試劑盒操作步驟：

小鼠瘦素（LEP）ELISA試劑盒組成：
試劑盒組成48 孔配置96 孔配置保存
說(shuō)明書(shū)1 份1 份
封板膜2 片(48)2 片(96)
密封袋1 個(gè)1 個(gè)
酶標包被板1×481×962-8℃保存
標準品：540μg/L0.5ml×1 瓶0.5ml×1 瓶2-8℃保存
標準品稀釋液1.5ml×1 瓶1.5ml×1 瓶2-8℃保存
酶標試劑3 ml×1 瓶6 ml×1 瓶2-8℃保存
樣品稀釋液3 ml×1 瓶6 ml×1 瓶2-8℃保存
顯色劑 A 液3 ml×1 瓶6 ml×1 瓶2-8℃保存
顯色劑 B 液3 ml×1 瓶6 ml×1 瓶2-8℃保存
終止液3 ml×1 瓶6 ml×1 瓶2-8℃保存
濃縮洗滌液(20ml×20 倍)×1 瓶(20ml×30 倍)×1 瓶2-8℃保存

作步驟：

1. 使用前，將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫，以免加樣時(shí)加入大量的氣泡，產(chǎn)生加樣上的誤差。

2. 根據待測樣品數量加上標準品的數量決定所需的板條數。每個(gè)標準品和空白孔建議做復孔。每個(gè)樣品根據自己的數量來(lái)定，能使用復孔的盡量做復孔。

3. 加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板，輕輕振蕩混勻，37℃溫育45分鐘。

4. 甩去孔內液體，每孔加滿(mǎn)洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復此操作4次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數增加一次。

5. 每孔加入100ul的親和鏈酶素-HRP，輕輕振蕩混勻，37℃溫育30分鐘。

6. 甩去孔內液體，每孔加滿(mǎn)洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復此操作4次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數增加一次。

7. 每孔加入底物A、B各50ul，輕輕振蕩混勻，37℃溫育5分鐘。避免光照。

8. 取出酶標板，迅速加入50ul終止液，加入終止液后應立即測定結果。

9. 在450nm波長(cháng)處測定各孔的OD值。

結 果 判 斷 與分析：

1、儀器值：于波長(cháng)450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值

2、以吸光度OD值為縱坐標(Y)，相應的指標標準品濃度為橫坐標(X)，做得相應的曲線(xiàn)，樣品的含量可根據其OD值由標準曲線(xiàn)換算出相應的濃度, 再乘以稀釋倍數;或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線(xiàn)的回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數，即為樣品的實(shí)際濃度。

產(chǎn)品用途：可用于科研實(shí)驗,不用于臨床治療！