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常見(jiàn)培養基的操作方法和注意事項
更新時(shí)間:2019-11-26瀏覽:3041次

  常見(jiàn)培養基的操作方法和注意事項:

  加水:

  打開(kāi)滅菌鍋蓋,向鍋內加水到水位線(xiàn)。立式消毒鍋用已煮開(kāi)過(guò)的水,以便減少水垢在鍋內的積存。注意水要加夠,防止滅菌過(guò)程中干鍋。裝料、加蓋滅菌材料放好后,關(guān)閉滅菌器蓋,采用對角式均勻擰緊鍋蓋上的螺旋,使蒸汽鍋密閉,勿使漏氣。

  排氣:

  打開(kāi)排氣口(也叫放氣閥)。用電爐加熱,待水煮沸后,水蒸氣和空氣一起從排氣孔排出,當有大量蒸汽排出時(shí),維持5min,使鍋內冷空氣*排凈。

  升壓、保壓和降壓:

  當鍋內冷空氣排凈時(shí),即可關(guān)閉排氣閥,壓力開(kāi)始上升。當壓力上升至所需壓力時(shí),控制電壓以維持恒溫,并開(kāi)始計算滅菌時(shí)間,待時(shí)間達到要求(一般培養基和器皿滅菌控制在121℃,20min)后,停止加熱,待壓力降至接近“0”時(shí),打開(kāi)放氣閥。注意不能過(guò)早過(guò)急地排氣,否則會(huì )由于瓶?jì)葔毫ο陆档乃俣缺儒亙嚷斐善績(jì)纫后w沖出容器之外。

  滅菌后的培養基空白培養:

  滅菌后的培養基放于37℃培養箱中培養,經(jīng)24h培養無(wú)菌生長(cháng),可保存備用;斜面培養基取出后,立即擺成斜面后空白培養;半固體的培養基垂直放置凝成半固體深層瓊脂后,空白培養。

  干熱滅菌法:

  通過(guò)使用干熱空氣殺滅微生物的方法叫干熱滅菌。一般是把待滅菌的物品包裝就緒后,放入電烘箱中烘烤,即加熱至160~170℃維持1~2h。

  干熱滅菌法常用于空玻璃器皿、金屬器具的滅菌。凡帶有膠皮的物品,液體及固體培養基等都不能用此法滅菌。

  滅菌前的準備:

  玻璃器皿等在滅菌前必須經(jīng)正確包裹和加塞,以保證玻璃器皿于滅菌后不被外界雜菌所污染。常用玻璃器皿的包扎和加塞方法如下:平皿用紙包扎或裝在金屬平皿筒內;三角瓶在棉塞與瓶口外再包以厚紙,用棉繩以活結扎緊,以防滅菌后瓶口被外部雜菌所污染;吸管以拉直的曲別針一端放在棉花的中心,輕輕捅入管口,松緊必須適中,管口外露的棉花纖維統一通過(guò)火焰燒去,滅菌時(shí)將吸管裝入金屬管筒內進(jìn)行滅菌,也可用紙條斜著(zhù)從吸管包起,逐步向上卷,頭端的紙卷捏扁并擰幾下,再將包好的吸管集中滅菌。

  干燥箱滅菌:

  將包扎好的物品放入干燥烘箱內,注意不要擺放太密,以免妨礙空氣流通;不得使器皿與烘箱的內層底板直接接觸。將烘箱的溫度升至160~170℃并恒溫1~2h,注意勿使溫度過(guò)高,超過(guò)170℃,器皿外包裹的紙張、棉花會(huì )被烤焦燃燒。如果是為了烤干玻璃器皿,溫度為120℃持續30分鐘即可。溫度降至60~70℃時(shí)方可打開(kāi)箱門(mén),取出物品,否則玻璃器皿會(huì )因驟冷而爆裂。

  用此法滅菌時(shí),絕不能用油、蠟紙包扎物品。

  火焰滅菌:

  直接用火焰灼燒滅菌,迅速*。對于接種環(huán),接種針或其它金屬用具,可直接在酒精燈火焰上燒至紅熱進(jìn)行滅菌。此外,在接種過(guò)程中,試管或三角瓶口,也采用通過(guò)火焰而達到滅菌的目的。

  結果:

  記錄各種不同物品所用的滅菌方法及滅菌條件(溫度、壓力等)。

  試述高壓蒸汽滅菌的過(guò)程及注意事項。

 

  注:以上資料僅供參考!

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