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天津本生簡(jiǎn)述:影響ELISA試劑盒實(shí)驗的因素
更新時(shí)間:2020-08-21瀏覽:1346次

  天津本生簡(jiǎn)述:影響ELISA試劑盒實(shí)驗的因素

  一、試劑盒

  1、抗原、抗體活性對效價(jià)的影響:主要是試劑中抗體(或抗原)的效價(jià)降低或失活,結果不易判斷。再有ELISA法靈敏度高,對雜質(zhì)的反應靈敏度也高,實(shí)驗中空白對照OD值偏高或假陽(yáng)性;

  2、酶結合物濃度過(guò)高,也會(huì )導致OD值假性增高。

  二、試驗儀器

  1、ELISA試劑盒加樣器是否經(jīng)過(guò)校正,酶免測定血清用血量很少,如手工加樣器的性能不好,吸取樣品不,會(huì )使結果忽高忽低;

  2、每次洗板前,應檢查洗板機針孔有無(wú)堵塞。

  三、操作

  1、檢測前先將試劑盒從冰箱取出置室溫平衡20min后使用,試劑用完及時(shí)放回冰箱冷藏,以免造成試驗結果假性降低;

  2、加樣時(shí)注意勿觸及包被板底部,以免擦傷包被物使抗體(抗原)脫落而影響實(shí)驗結果的準確性;

  3、洗滌不充分,會(huì )使結果假性增高,過(guò)分洗滌呈假陰性;

  4、比色時(shí)應保持包被孔底部無(wú)異物、無(wú)水汽,特別是冬季板從37℃水浴箱取出時(shí),底部留有水汽,應將板底擦干后進(jìn)行比色,水汽或孔內氣泡也會(huì )使OD值升高;

  5、抗原與抗體反應達到*平衡,依賴(lài)于溫度與時(shí)間。溫度高于45℃易引起失活及標記物脫落,溫度低于4℃,影響反應速度。

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