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注意操作大鼠Elisa試劑盒事項與步驟
大鼠Elisa試劑盒注意事項:
1. 大鼠Elisa試劑盒凍結與寄存:-20℃取出后主張放入2~8℃冰箱中凍結約,每隔一段時(shí)間悄悄搖晃均勻,不可直接放入溫度較高處凍結,防止因溫度改變太大,形成蛋白質(zhì)凝聚而出現沉積,血清的質(zhì)量下降。若短期無(wú)法用完一瓶,主張無(wú)菌分裝,再放回冷凍,防止反復凍融。4℃長(cháng)時(shí)間保存后血清中的變性脂蛋白及纖維蛋白,形成絮狀物質(zhì)變差。
2. 大鼠Elisa試劑盒是否滅活:加熱可滅活血清中補體系統,在極少數情況下(培育ES細胞,滑潤肌細胞時(shí))主張滅活,在培育其余細胞時(shí)不主張滅活血清。血清滅活十分簡(jiǎn)單產(chǎn)生沉積,如必須滅活請按56℃,30 min,輕微搖晃準則操作,滅活溫度高、時(shí)間長(cháng)、搖晃不均都簡(jiǎn)單產(chǎn)生沉積。
3. 大鼠Elisa試劑盒培育基:無(wú)血清培育基在結果重復性、細胞體外分化方面有優(yōu)勢,可是,血清仍然是培育液中最根本的添加物,尤其是在原代培育或細胞成長(cháng)狀況不良時(shí),常常會(huì )先使用有血清的培育液進(jìn)行培育,待細胞成長(cháng)旺盛后再換成無(wú)血清培育液。
大鼠Elisa試劑盒操作過(guò)程 :
1.用蓋片鑷人Elisa試劑盒將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無(wú)菌絲綢布擦拭潔凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片悄悄放入6孔培育板(每孔一片)或培育皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);
3.在間隔紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時(shí);
4.將通過(guò)計數的細胞懸浮液移入培育板中,使蓋玻片*浸在培育液中;
5.將人Elisa試劑盒培育板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞成長(cháng)至覆蓋培育板底部2/3面積時(shí),將培育板取出,用蓋片鑷悄悄取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細胞化學(xué)檢測。
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