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本生簡(jiǎn)述：血清使用中的常見(jiàn)問(wèn)題解答
1， 血清存儲方法?
血清一般儲存于-20℃，同時(shí)應避免反復凍融。購買(mǎi)大包裝的血清后，若無(wú)法一次用完，建議分裝成小包裝，儲存于-20℃。
2， 如何解凍血清?
使用前融化，融化時(shí)最好先置于2-8℃冰箱中使之溶解，然后在室溫下使之全溶，溶解過(guò)程
中必須規則地搖晃均勻。融化后的血清在4℃不宜長(cháng)時(shí)間存放，應盡快使用。
3，血清的使用濃度是多大?
使用濃度一般為5-20%，常用是10%。過(guò)多血清容易使培養中的細胞發(fā)生變化，特別是一些二倍體的無(wú)限細胞系，迅速生長(cháng)之后容易發(fā)生惡性轉化。
4，血清解凍后發(fā)現有絮狀沉淀物出現，該如何處理?
血清中沉淀物的出現有許多原因，但普遍的原因是由于血清中脂蛋白的變性造成的;而血纖維蛋白(形成凝血的蛋白之一)在血清解凍后，也會(huì )存在于血清中，亦是造成血清沉淀物的主要原因之一。但這些絮狀沉淀物，并不影響血清本身的質(zhì)量。 若您欲去除這些絮狀沉淀物，可以將血清分裝至無(wú)菌離心管中，以400g稍微離心，上清液即可接著(zhù)加入培養基內一起過(guò)濾。我們不建議您以過(guò)濾的方法去除這些絮狀沉淀物，因為它可能會(huì )阻塞您的過(guò)濾膜。
5.何謂熱滅活?有必要做熱滅活嗎?
一般以56℃，30分鐘水浴來(lái)處理已解凍的血清，因為此加熱步驟，可以使補體去活性，而補體所參與的反應有：溶細胞活性，平滑肌的收縮，肥大細胞和血小板組胺的釋放，增強吞噬作用，淋巴細胞、巨噬細胞的趨化和激活。
實(shí)驗顯示，經(jīng)過(guò)正確處理的熱滅活血清，對大多數的細胞而言是不需要的。經(jīng)過(guò)處理的血清對細胞生長(cháng)只有微小的促進(jìn)，或沒(méi)有任何作用，甚至通常因為高溫處理影響了血清的質(zhì)量，而造成細胞生長(cháng)速率的降低。而經(jīng)過(guò)熱處理的血清，沉淀物的形成會(huì )顯著(zhù)的增多，這些沉淀物在倒置顯微鏡下觀(guān)察，像是“小黑點(diǎn)"，常常會(huì )讓研究者誤以為是血清遭受污染，而把血清放在37℃環(huán)境中，又會(huì )使此沉淀物更增多，使研究者認為是微生物的分裂擴增。因此我們建議您，若非必須，您可以不需要做熱滅活這一步。如此以來(lái)，不但節省您寶貴的時(shí)間，更確保您血清的質(zhì)量!
6.如何避免沉淀物的出現?
我們建議您在使用血清的時(shí)候，注意正確的血清解凍步驟，并盡量避免滅活血清及長(cháng)時(shí)間的將血清置于高溫環(huán)境中。
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