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ELISA實(shí)驗標準品正確溶解與稀釋
ELISA是酶聯(lián)接免疫吸附劑測定( Enzyme-Linked Immunosorbnent Assay )的簡(jiǎn)稱(chēng)，是一種檢測方法，而標準品是相對于具體的物質(zhì)有具體的標準品，所以不存在說(shuō)ELISA的標準品。ELISA標準曲線(xiàn)是結果計算的尺子，標準品是ELISA 實(shí)驗成功與否的關(guān)鍵點(diǎn)。正確溶解、稀釋標準品如下：
1. 粉末標準品短暫離心，讓因運輸沾到管蓋、管壁的標準品沉到管底。
2. 根據瓶標簽加入一定體積的蒸餾水，加水后輕柔渦旋震蕩，室溫靜置溶解 10-30min，讓粉末*溶解。
注意：加水后暫不用移液槍吹吸，避免蛋白未溶解，槍頭帶出部分蛋白，待*溶解后可吹吸或渦旋振蕩混勻。
3. 標準品梯度稀釋:
(1)標準品稀釋液的選擇：
若血清、血漿、組織勻漿樣本，用試劑盒中的標準品稀釋液，梯度稀釋標準品。
若細胞上清樣本，建議用細胞培養基梯度稀釋標準品。
(2)耗材準備：準備8個(gè)1.5Ml離心管，寫(xiě)上S1-S7、空白。
(3)梯度稀釋?zhuān)焊鶕f(shuō)明書(shū)，每管加入等體積的標準品稀釋液(培養基)。吸取同體積溶解好的標準品到S1管中，吹打10次混勻，渦旋5S。從S1管中吸取同體積溶液到 S2管，吹打10次混勻，渦旋5s。同法稀釋S3-S7濃度。
(4)空白: 標準品稀釋液(培養基)作為空白即零濃度。
注意：梯度稀釋標準品時(shí)，渦旋震蕩混勻后可短暫離心，讓到蓋子、壁上的液體到管底，再開(kāi)始稀釋下個(gè)濃度。
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