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天津本生-全黑全白96孔板鋪板技巧
更新時(shí)間:2023-12-21瀏覽:476次

  天津本生-全黑全白96孔板鋪板技巧


  剛開(kāi)始用96孔板種細胞 時(shí)細胞總是分布不均勻,第二天就會(huì )發(fā)現有些地方出現堆積性生長(cháng),而還有不少地方細胞則很稀疏,細胞密集的地方因細胞與細胞之間的接觸抑制影響細胞的生長(cháng),這樣就很難評價(jià)干預因素對細胞的作用,因此將96孔板種均勻也是進(jìn)行后續實(shí)驗時(shí)候,現將天津本生小編以用的舊法和用的新法比較一下,以讓大家看看各自?xún)?yōu)缺。

  1、舊法:種過(guò)板子后,用手將96孔板平拿起,左右晃動(dòng)幾下,然后再后晃動(dòng)幾下,不過(guò)這種方法5個(gè)復孔中總有2-3個(gè)孔中細胞分布不均勻,多數情況下是孔的中間出現成堆分布,為此苦惱了一陣子。還又一次見(jiàn)一師姐將種好的板子放在搖床上搖了幾分鐘,結果更慘了,細胞全部跑到中間了。


微孔板.jpg


  一般96孔板我每孔是加100微升細胞懸液,從孔的左邊靠近底部加入,加完半邊板后,將未加的細胞懸液混一下再,繼續加剩余的半邊板子,都加完后蓋上蓋子,左手輕輕扶住板的左邊,右手輕輕敲擊板的右邊緣,注意把握力度(我一般輕巧敲三下),太強或次數太多會(huì )導致細胞集中成堆,將板順時(shí)針旋轉(逆時(shí)針效果不好),依次敲擊剩余三個(gè)邊,靜置約5分鐘,放入37度培養 箱。

  2、新法:這種方法簡(jiǎn)直是太好了,種的很均勻。先用移液槍將吹打均勻的細胞吸起來(lái),讓后將槍頭緊貼著(zhù)孔的一側壁(注意槍頭的尖不要接觸孔底),然后將槍頭中的細胞緩緩的打下去,種好之后千萬(wàn)不要搖晃板子,直接放到顯微鏡 下看就可以了,此方法可以說(shuō)是100%的有效吧。 希望對大家有幫助。

  補充:從6孔板到96空板要細胞分散均勻,先用培養基把細胞稀釋好,再把培養板放在適當的位置,加入細胞時(shí)和加入細胞后不移動(dòng)培養板;如果空中有的地方?jīng)]有培養基可吹打,但不要移動(dòng)培養板,加入細胞后靜置20-30分鐘再移入培養箱。這樣細胞一般都能長(cháng)的很均勻。當然,提是細胞消化的很好。

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