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人原鈣黏素ELISA試劑盒洗板及實(shí)驗細節
由于“人原鈣黏素ELISA試劑盒"具有的特異性,抗原抗體的結合發(fā)生在抗原的決定簇與抗體的結合位點(diǎn)之間。那么人原鈣黏素ELISA試劑盒洗板方法有以下兩點(diǎn)。
1. 手工洗板方法:吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標板內的液體;在實(shí)驗臺上鋪墊幾層吸水紙,酶標板朝下用力拍幾次;將推薦的洗滌緩沖液至少0.3ml注入孔內,浸泡1-2分鐘,根據需要,重復此過(guò)程數次。
2. 自動(dòng)洗板:如果有自動(dòng)洗板機,應在熟練使用后再用到正式實(shí)驗過(guò)程中。待檢樣本:體液、血清、血漿、細胞培養上清液、尿液、組織勻漿、心房水標本等
人原鈣黏素ELISA試劑盒的樣品采集方法,是收集標本前必須清楚要檢測的成份是否足夠穩定。對收集后當天進(jìn)行檢測的標本,儲存在4℃備用,如有特殊原因需要周期收集標本,將標本及時(shí)分裝后放在-20℃或-70℃條件下保存。避免反復凍融。標本2-8℃可保存48小時(shí),-20℃可保存1個(gè)月。-70℃可保存6個(gè)月。部分激素類(lèi)標本需添加抑肽酶。
實(shí)驗科研者們往往對結果最為關(guān)注,而因此忽略了細節問(wèn)題,但結果取決于細節!
根據采用的載體分為:
1.疏水性聚脂布作為載體;
2.聚苯乙烯微量板為載體;
3.纖維膜為載體。
ELISA是將酶催化的放大作用與特異性抗原抗體反應結合起來(lái)的一種微量分析技術(shù)。酶標記抗原或抗體以后,既不影響抗原抗體反應的特異性,也不改變酶本身的活性。因為ELISA試劑盒價(jià)格低廉且準確性搞、反應時(shí)間短等優(yōu)點(diǎn),所以適合大批量的檢測,一般常常用于食品安全檢測方面。
ELISA需要遵循的幾個(gè)細節要點(diǎn):
1.抗原或抗體能吸附于固相載體表面,并保持其免疫學(xué)活性;
2.抗原或抗體可通過(guò)共價(jià)鍵與酶連接形成酶結合物,而此種酶結合物仍能保持其免疫學(xué)和酶學(xué)活性;
3.酶結合物與相應抗原或抗體結合后,可根據加入底物的顏色反應來(lái)判定是否有免疫反應的存在,而且顏色反應的深淺是與標本中相應抗原或抗體的量成正比例的,可根據已知濃度的抗原或抗體的顏色反應的深淺繪制標準曲線(xiàn)并依此計算出未知樣品中抗體或抗原的濃度。
除了以上內容,在ELISA試劑盒細節中,稀釋前、后的樣品必須充分混勻,所有試劑在加樣前也須搖勻,以保證試驗的均一性。
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