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　　使用PCR板時(shí)防止錯誤的幾個(gè)技巧

　　聚合酶鏈式反應 (PCR) 是生命科學(xué)實(shí)驗室中廣為人知的方法之一。PCR 板由的塑料制成，可對收集的樣品或結果進(jìn)行出色的處理和分析。它們具有薄而均勻的壁，可提供精確的熱傳遞。在為實(shí)時(shí)應用做準備時(shí)，DNA 或 RNA 的微小部分被隔離并儲存在 PCR 板中。

　　PCR 板在熱封方面非常有效，并且還限制了熱量的流動(dòng)。然而，由于 PCR 板有效且可靠，在處理樣品時(shí)容易出錯和不準確。因此，如果您有興趣獲得優(yōu)質(zhì)的PCR板。最好聯(lián)系可靠的 PCR 板制造商。有了這個(gè)，您可以確保獲得惠的價(jià)格。以下是一些注意事項，可避免試劑或樣品受到污染，并防止結果不準確。

　　對環(huán)境進(jìn)行消毒

　　由于存在雜質(zhì)，會(huì )出現不正確的陽(yáng)性或陰性結果，這會(huì )讓您懷疑結果。

　　雜質(zhì)和污染物以各種形式出現，例如不相關(guān)的 DNA 或化學(xué)添加劑，最終會(huì )降低反應的效率和有效性。

　　有許多方法可以大大降低 PCR 板的污染率。

　　使用已滅菌的濾芯吸頭是另一種防止雜質(zhì)通過(guò)移液器進(jìn)入樣品的有用方法。

　　提供一套干凈的設備，包括移液器和架子，專(zhuān)門(mén)用于 PCR。這將保證實(shí)驗室周?chē)碾s質(zhì)或污染物轉移可忽略不計。

　　在移液器、架子和長(cháng)凳上使用漂白劑、乙醇來(lái)擦去污染物。

　　為所有 PCR 反應分配預留空間，以進(jìn)一步減少顆粒污染。

　　在每一步都使用干凈的手套并經(jīng)常更換。

　　PCR 板

　　檢查模板的濃度和純度。

　　應保持使用 PCR 分析樣品時(shí)使用的工作臺和設備的清潔度。在分析和處理之前驗證樣品的純度至關(guān)重要。

　　通常，分析儀會(huì )考慮 DNA 樣本的濃度和純度水平。

　　爭取260nm/280nm的吸光度比不得小于1.8。而隨后使用 230nm 和 320nm 之間的波長(cháng)來(lái)識別雜質(zhì)。

　　在一個(gè)例子中，離液鹽和其他有機化合物在 230nm 的吸收率下被檢測到。同時(shí)在 320nm 的吸光度下檢測和驗證 DNA 樣品中的濁度。

　　避免 PCR 板與產(chǎn)品過(guò)載：

　　盡管希望同時(shí)運行多個(gè)產(chǎn)品，但它會(huì )導致 PCR 板的交叉污染。

　　用不同的產(chǎn)品使 PCR 板超載會(huì )浪費，并且很難確定樣品。

　　保留等分 PCR 試劑的記錄：

　　連續冷凍/解凍循環(huán)和頻繁使用等分可能會(huì )通過(guò)重結晶損壞 PCR 試劑、酶和 DNTP。

　　在準備要分析的樣品時(shí)，始終努力監控使用的等分試樣的速率。

　　優(yōu)選的 LIMS 更適合控制試劑和樣品冷凍或解凍的庫存和數量。

　　選擇最佳退火溫度：

　　選擇和使用錯誤的退火溫度是另一種方法 PCR 結果包含錯誤。

　　有時(shí)，反應并沒(méi)有按計劃進(jìn)行。需要降低退火溫度以促進(jìn)成功的反應。

　　然而，降低溫度會(huì )增加假陽(yáng)性和引物二聚體出現的機會(huì )。

　　在使用 PCR 板時(shí)，確認熔解曲線(xiàn)的分析具有重要意義，因為它是選擇正確退火溫度的良好指標。

　　引物設計軟件輔助設計，提供正確的退火溫度，直接減少 PCR 板中的錯誤。

　　PCR板 本生一直視質(zhì)量控制為企業(yè)的生命，追求企業(yè)競爭力的不斷提升。公司在經(jīng)營(yíng)中始終秉承：遵紀守法，嚴于律己，寬仁以待，敢于承擔的企業(yè)精神作為標準，以過(guò)硬的質(zhì)量和優(yōu)良的服務(wù)來(lái)維護和拓展市場(chǎng)，較大限度的滿(mǎn)足客戶(hù)的需求。與客戶(hù)的共贏(yíng)，是我們的發(fā)展目標。本生!您信任的合作伙伴。我們愿與您真誠合作，共創(chuàng )美好的未來(lái)。